Cofoncal microscopy

PRINCIPE

La microscopie confocale à balayage laser permet d’optimiser la résolution des images en microscopie de fluorescence.
Ce système permet de réaliser des coupes optiques extrêmement fines (inférieure à 0,8µm d’épaisseur) à l’aide d’un diaphragme (pinhole), et ainsi de procéder à une véritable dissection optique de l’échantillon sans aucune altération ni préparation préalable, contrairement à d’autres méthodes comme la microscopie électronique.
Ce système offre l’avantage de pouvoir observer la dynamique (spatiale et temporelle) de molécules marquées ou fluorophores intrinsèques directement chez la cellule vivante.

Équipement :

La plateforme d’imagerie confocale est équipée d’un système LSM 510 Meta (ZEISS), doté d’un laser Argon (λex 458nm, 477nm, 488nm et 514nm) et de 2 lasers Hélium-Néon (λex 543nm et 633nm), offrent une large gamme de raies excitatrices pour un grand nombre de molécules fluorescentes.
Il est associé à un microscope AXIOVERT 200 avec une source lumière propre (lampe à mercure à arc court FLUOARC).
Enfin, le statif inversé est équipé d’un objectif 10x et de trois objectifs à immersion 40x, 63x et 100x.
Par ailleurs, le mode Meta du système permet la simulation d’une analyse spectrale de l’image grâce à des filtres bande passante qui permettent de sélectionner une largeur de bande inférieure à 10nm.

Voir aussi dans «Platform – Cytometry and cellular imaging P@CYFIC»

Flow cytometry The fluorescence microscopy video