Flow cytometry

Flow cytometry allows the qualitative and quantitative analysis of cells, bacteria, organelles or particles under non-toxic high throughput conditions.

This technique allows the phenotyping of cells within a heterogeneous population by immunofluorescence. Various parameters such as size, granulosity and any components or functions that can be revealed by a fluorescent probe can be analyzed.

Flow cytometry also allows cell sorting according to cell physical or biological characteristics observed during the analysis.

Analyse cellulaire

La cytométrie en flux permet l’analyse des caractéristiques physico-chimiques de cellules, dans des conditions non toxiques, de façon qualitative et quantitative, à haut débit.
Les paramètres cellulaires extrinsèques peuvent être révélés par une sonde fluorescente interagissant spécifiquement avec la cellule ou certains de ses éléments (Fluorescence Activated Cell Sorter).

Outils d'analyses cellulaires

La cytométrie en flux permet l’étude statistique d’un échantillon cellulaire afin d'obtenir des résultats qualitatifs et quantitatifs. Ils sont mis à la disposition des personnes ayant suivi une formation spécifique.

Les deux cytomètres en flux analyseurs présentés ci-dessous sont utilisés lors d'études incorporant un nombre varié de molécules fluorescentes, permettant ainsi de multiplier les paramètres expérimentaux.

Le BD FORTESSA X20 (Becton Dickinson) est équipé de 4 lasers (λex488nm / λex633nm / λex405nm / λex561nm) Il permet la détection de 18 paramètres simultanément (taille, granulosité et fluorescences à 16 longueurs d’onde d’émission). Ce cytomètre en flux est associé au logiciel de pilotage et d’analyse DiVa.

Le BD FACSort (Becton Dickinson) est équipé d’un laser Argon dont la longueur d’onde d’excitation est de λex488nm. Il permet la détection de 5 paramètres simultanément (taille, granulosité et fluorescences à 3 longueurs d’onde d’émission). Ce cytomètre en flux est associé au logiciel de pilotage et d’analyse CellQuestPro.

Tri cellulaire

Le tri cellulaire permet de purifier des sous populations à partir d’une population hétérogène, d’éliminer des cellules mortes d’une culture et de faire du clonage en plaçant une cellule par puits dans une plaque de culture. Basse ou haute pression ? Quel type de tri convient le mieux à votre étude ?

Outils de tri cellulaire :

Le BD FACS Vantage DiVa possède trois lasers (λex358nm, λex488nm et λex633nm) associés aux différentes options de tri. Il permet de trier jusqu’à 4 populations simultanément, d’effectuer des tris en plaques multi-puits, du clonage, le tout à haut débit. Ce trieur de cellules est associé au logiciel de pilotage et d’analyse DiVa.

Le BD ARIA III S.O.R.P (Becton Dickinson) est équipé de 4 lasers (λex488nm / λex633nm / λex405nm / λex561nm) Il permet la détection de 18 paramètres simultanément (taille, granulosité et fluorescences à 16 longueurs d’onde d’émission).Il possède la même configuration optique que le BD FORTESSA X20. Il permet de trier jusqu’à 4 populations simultanément, d’effectuer des tris en plaques multi-puits, du clonage, le tout à haut débit. Ce trieur de cellules est associé au logiciel de pilotage et d’analyse DiVa.

Voir aussi dans «P@CYFIC (cellular imaging and flow cytometry)»

Cofoncal microscopy Confocal microscopy allows to optimize the resolution of the images in fluorescence microscopy and to observe the intracellular elements in three dimensions. It realizes virtual optical slices in the observed object and records the optical signals emitted in each plane. The fluoresence microscopy video This tool allows to visualize different dynamic cellular phenomena (internalization, transmigration, rolling, adhesion, angiogenesis ...) and to carry out cell-cell or cell-particle interaction measurements under flow conditions close to the blood circulation.